Q：什么是靶向治療？
靶向治療是在細(xì)胞分子水平上，針對(duì)已經(jīng)明確的致癌位點(diǎn)的治療方式(該位點(diǎn)可以是腫瘤細(xì)胞內(nèi)部的一個(gè)蛋白分子，也可以是一個(gè)基因片段)。可設(shè)計(jì)相應(yīng)的治療藥物，藥物進(jìn)入體內(nèi)會(huì)特異地選擇致癌位點(diǎn)來相結(jié)合發(fā)生作用，使腫瘤細(xì)胞特異性死亡，而不會(huì)波及腫瘤周圍的正常組織細(xì)胞，所以分子靶向治療又被稱為"生物導(dǎo)彈"。
不同分類的分子靶向藥物針對(duì)的是不同的基因靶點(diǎn)，通過驅(qū)動(dòng)基因檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)是否存在相應(yīng)的基因靶點(diǎn)，從而有針對(duì)性地為患者選擇合適的靶向藥物。
不同分類的分子靶向藥物針對(duì)的是不同的基因靶點(diǎn)，通過驅(qū)動(dòng)基因檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)是否存在相應(yīng)的基因靶點(diǎn)，從而有針對(duì)性地為患者選擇合適的靶向藥物。
Q：FISH、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、二代測(cè)序、免疫組化的區(qū)別和一般用途？
（1）FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是熒光標(biāo)記的原位雜交技術(shù)。它的基本原理是：如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。該技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位，而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。
（2）實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。廣泛應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷等各臨床醫(yī)學(xué)相關(guān)的領(lǐng)域。
（3）高通量測(cè)序技術(shù)（High-throughput sequencing）又稱“下一代”測(cè)序技術(shù)（"Next-generation" sequencing technology），以能一次并行對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定和一般讀長較短等為標(biāo)志。廣泛應(yīng)用于全基因組水平、轉(zhuǎn)錄組水平上進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、進(jìn)行小分子RNA測(cè)序等方面。
（4）免疫組化又稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。在常規(guī)腫瘤病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化腫瘤的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
博奧的腫瘤單基因檢測(cè)產(chǎn)品ALK/ROS1/HER-2/RET/MET/BRAF基因檢測(cè)，主要應(yīng)用FISH技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，在2018版的CSCO肺癌指南中，推薦NSCLC應(yīng)平行進(jìn)行EGFR/ALK/ROS1基因的檢測(cè)，在標(biāo)本量有限的情況下，可采用經(jīng)過驗(yàn)證的檢測(cè)方法同時(shí)檢測(cè)多個(gè)驅(qū)動(dòng)基因的技術(shù)， 如多基因同時(shí)檢測(cè)的PCR技術(shù)或二代測(cè)序技術(shù)（next generation sequencing， NGS） 等。博奧腫瘤的多基因Panel檢測(cè)產(chǎn)品主要采用NGS方法，PD-L1、MMR主要采用免疫組化的方法進(jìn)行檢測(cè)，為患者提供多組學(xué)、全方位的檢測(cè)。
（2）實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。廣泛應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診斷；遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷等各臨床醫(yī)學(xué)相關(guān)的領(lǐng)域。
（3）高通量測(cè)序技術(shù)（High-throughput sequencing）又稱“下一代”測(cè)序技術(shù)（"Next-generation" sequencing technology），以能一次并行對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定和一般讀長較短等為標(biāo)志。廣泛應(yīng)用于全基因組水平、轉(zhuǎn)錄組水平上進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、進(jìn)行小分子RNA測(cè)序等方面。
（4）免疫組化又稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。在常規(guī)腫瘤病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化腫瘤的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
博奧的腫瘤單基因檢測(cè)產(chǎn)品ALK/ROS1/HER-2/RET/MET/BRAF基因檢測(cè)，主要應(yīng)用FISH技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，在2018版的CSCO肺癌指南中，推薦NSCLC應(yīng)平行進(jìn)行EGFR/ALK/ROS1基因的檢測(cè)，在標(biāo)本量有限的情況下，可采用經(jīng)過驗(yàn)證的檢測(cè)方法同時(shí)檢測(cè)多個(gè)驅(qū)動(dòng)基因的技術(shù)， 如多基因同時(shí)檢測(cè)的PCR技術(shù)或二代測(cè)序技術(shù)（next generation sequencing， NGS） 等。博奧腫瘤的多基因Panel檢測(cè)產(chǎn)品主要采用NGS方法，PD-L1、MMR主要采用免疫組化的方法進(jìn)行檢測(cè)，為患者提供多組學(xué)、全方位的檢測(cè)。
Q：一名左半結(jié)腸癌患者，剛剛完成手術(shù)，后期需要進(jìn)行治療，可以推薦使用哪款產(chǎn)品檢測(cè)，說明其原因？
可以考慮使用結(jié)直腸癌靶向用藥指導(dǎo)基因檢測(cè)（血液14基因）、結(jié)直腸癌靶向用藥指導(dǎo)基因檢測(cè)（組織22基因）、標(biāo)準(zhǔn)版腫瘤靶向用藥基因檢測(cè)（組織52基因），或使用組織樣本進(jìn)行KRAS/NRAS/BRAF的單基因檢測(cè)。
原因是抗EGFR靶向治療的療效與部位之間存在很明顯的關(guān)系。在左半結(jié)腸中，無論是帕尼單抗還是Cet，與單純化療或化療聯(lián)合Bev的治療對(duì)比，抗EGFR均能帶來顯著獲益；而在右半結(jié)腸，與單純化療相比，抗EGFR靶向治療的獲益則明顯減少或不能獲益；Bev在右半結(jié)腸的獲益顯著高于抗EGFR靶向治療。故考慮到左半腸患者中使用EGFR單抗，檢測(cè)EGFR信號(hào)通路基因，使用小Panel即可達(dá)到目標(biāo)且更經(jīng)濟(jì)。
原因是抗EGFR靶向治療的療效與部位之間存在很明顯的關(guān)系。在左半結(jié)腸中，無論是帕尼單抗還是Cet，與單純化療或化療聯(lián)合Bev的治療對(duì)比，抗EGFR均能帶來顯著獲益；而在右半結(jié)腸，與單純化療相比，抗EGFR靶向治療的獲益則明顯減少或不能獲益；Bev在右半結(jié)腸的獲益顯著高于抗EGFR靶向治療。故考慮到左半腸患者中使用EGFR單抗，檢測(cè)EGFR信號(hào)通路基因，使用小Panel即可達(dá)到目標(biāo)且更經(jīng)濟(jì)。
Q：TMB是什么?
TMB是Tumor Mutation Burden（腫瘤突變負(fù)荷），腫瘤細(xì)胞基因組內(nèi)代表蛋白編碼區(qū)的突變分布的密度，以蛋白編碼區(qū)的突變位點(diǎn)總數(shù)除以蛋白編碼區(qū)的總堿基數(shù)目，單位為mutations/MB。?
Q：博奧的腫瘤檢測(cè)產(chǎn)品是否有醫(yī)療器械注冊(cè)證？
博奧腫瘤產(chǎn)品目前正處于報(bào)證階段。目前市場(chǎng)上獲證的產(chǎn)品癌種均為肺癌，報(bào)證的基因數(shù)為3-10個(gè)，雖然醫(yī)院可以自己開展檢測(cè)，但并不能滿足臨床需求，患者的獲益情況有限；博奧的腫瘤產(chǎn)品線，能夠?qū)δ[瘤患者進(jìn)行全程管理，同時(shí)博奧資質(zhì)齊全，保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。
Q：全能版腫瘤個(gè)體化用藥指導(dǎo)基因檢測(cè)(800基因)計(jì)算TMB值準(zhǔn)確嗎？
計(jì)算TMB的金標(biāo)準(zhǔn)是組織樣本做全外顯子測(cè)序。全能版腫瘤個(gè)體化用藥指導(dǎo)基因檢測(cè)（800基因）中，有601個(gè)基因檢測(cè)的是全外顯子區(qū)域，是市場(chǎng)上大panel中檢測(cè)基因全外顯子數(shù)量最多的。全能版腫瘤個(gè)體化用藥指導(dǎo)基因檢測(cè)（800基因）TMB值與WES一致率高達(dá)95.2%，bTMB與組織驗(yàn)證一致性75.5% 。
Q：對(duì)于尋求靶向藥物的非小細(xì)胞肺癌患者來說，做個(gè)肺癌小panel就足夠了，做大panel是不是沒有意義？
患者接受的基因檢測(cè)覆蓋面更廣，就更有可能發(fā)現(xiàn)潛在的治療方法。這種方法在關(guān)鍵時(shí)刻能救命，而且例子并不罕見。例如2018年獲批的廣譜靶向抗癌藥拉羅替尼的靶點(diǎn)NTRK基因融合，在肺癌小panel中是不包括這個(gè)基因的，組織52基因和800基因均包括NTRK1/2/3融合的檢測(cè)。
Q：乳腺癌BRCA1/BRCA2基因突變檢測(cè)的臨床意義，及乳腺癌患者報(bào)告問題？
預(yù)防指導(dǎo)：BRAC1/2基因突變可以為高危人群或健康人群的患病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提高參考，通過預(yù)防性措施降低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)為突變攜帶人群親屬的患病風(fēng)險(xiǎn)提供風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估參考;用藥指導(dǎo)，BRAC1/2基因突變的乳腺癌卵巢癌患者對(duì)鉑類和PARP抑制劑類藥物（奧拉帕尼）敏感; 預(yù)后評(píng)估，BRAC1/2基因突變攜帶者有相對(duì)高的同側(cè)乳腺癌復(fù)發(fā)或?qū)y(cè)乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)BRAC1/2基因突變是保乳治療的相對(duì)禁忌癥。目前我們報(bào)告只出具預(yù)防指導(dǎo)報(bào)告，但很快我們上線針對(duì)腫瘤患者的用藥指導(dǎo)報(bào)告。
